LIPIDOMICKÉ PROFILOVÁNÍ PACIENTŮ S ONEMOCNĚNÍM KARDIOVASKULÁRNÍHO APARÁTU

Úvod:
Lipidomika: rozpoznávání úlohy lipidů v biologických systémech a jejich participaci na vzniku řady onemocnění jako je například obezita, ateroskleróza, diabetes mellitus, hypertenze.
Cíl: Představení projektu lipidomického profilování
Metoda: Vypracování analytických metod pro komplexní charakteristiku lipidomu v lidské plazmě a erytrocytární membráně užitím kombinovaných chromatografických metod HPLC/MS, UHPLC/MS, GC/FID. Cílem je screening všech lipidových tříd a následně lipidomická charakteristika 30 osob s definovaným kardiovaskulárním postižením (DKMP EF <35 %/fibrilace, flutter síní s EF>35 %/stav po IM EF>35 %) oproti kontrolám bez známek nemoci (20 osob).

Výsledky: Metodika komplexní lipidomické analýzy na principu zpracování lipidových extraktů: centrifugací separovány erytrocyty a plasma.
1.krok za použití HILIC (hydrophilic interaction liquid chromatography) analýzy, umožňující izolaci více než 15 tříd polárních lipidů (např.fosfolipidů, sfingolipidů, glykolipidů atd). Nepolární lipidy (triacylglyceroly, diacylglyceroly, steroly, cholesterolové estery separovány a kvantifikovány metodou LC/MS (liquid chromatography-mass spectrometry).  2.krok: izolované frakce lipidových tříd separovány za použití reverzní fáze HPLC se sloupcem C18 částic, nebo s použití partikulí <2 μm při užití UHPLC (ultrahigh-performance liquid chromatography – mass spectrometry).  Lipidové species rozděleny dle délky acylových řetězců, počtu a pozice zdvojených vazeb jednotlivých mastných kyselin. Názorná demonstrace grafického profilování mastných kyselin.
Závěr: Ověřena efektivní metodika lipidomického profilování za použití 1D a 2D LC/MS metod, zahrnujících metody silver-ion, RP and chiral HPLC; provedeny odběry biologického materiálu  probandů. V 2012 budou provedeny kontrolní odběry a statistické vyhodnocení.
Práce vznikla za podpory projektu GAČR č.206/11/0022.